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抗酸染色液如何制作?

文章出处:本站    人气:746    发表时间:2020-02-10 19:50:43

工业中的化学制剂研发,抗酸染色液,通常用于分枝杆菌染色以便直接进行显微镜检查。在这个领域中,抗酸染色法也是不容忽视的名词,那么,抗酸染色液制造方法有哪些?本染色方法系在参照世界卫生组织(WHO)所推荐的标准Ziehl-Neelsen法进行改良的,主要用于对结核杆菌等抗酸性菌的化学染色,抗酸染色有两种常用方法:①碱性复红法又称萋-尼氏(Ziehl -Neelsen)法;②荧光染料金胺0法(也称金胺罗丹明法)。

抗酸染色液采用的是改良碱性复红法,可以不用加温,属于Kinyoun冷染色法,无需加热,相对较抗酸热染液安全,其染色原理是在室温条件下分枝菌酸与复红结合成复合物,经亚甲蓝复染后分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色。

结核菌、麻疯杆菌等抗酸性菌,因其菌体表面有一层类脂或脂质之皮膜而不易着色,但一经着色后经酸性乙醇的作用亦是不容易把它脱色,利用此特性并以增强的染色液予染色,然后再以酸性乙醇加以处理,使其脱色后再对比染色,此时抗酸性菌仍是固定着初色素的颜色(红色),也就易于鉴别。

抗酸染色一般步骤:

1)初染:用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗。

2)脱色:3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗。

3)复染:用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察。

抗酸染色法的细菌染色法,其中代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森(Ziehl-Neelsen)染色法和齐尔-加贝特(Ziehl-Gabbet)染色法,用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。


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